转基因大豆及其制品二重荧光定量PCR的建立与验证

• 作者: 包永华 叶素丹 王凤军 陈冠武
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 转基因大豆 二重实时荧光PCR 快速筛选检测 深加工制品
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 236-239,271
• 页数: 5页
• 分类号: TS214.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2018.08.043

摘要

研究选用花椰菜花叶病毒35S启动子(P-35S)和根癌农杆菌胭脂碱合成酶基因终止子(T-NOS)为靶标基因,运用多重实时荧光PCR技术对转基因大豆及其制品进行快速筛选检测.实验通过样品核酸提取与质控,多重引物及荧光探针的设计与筛选,反应条件和反应体系的对比优化,摸索出二重荧光定量PCR检测的最佳反应体系.同时通过特异性、重复性、灵敏性和适用性实验验证,确保了该方法在同时检测2个靶标基因时,无荧光信号的相互干扰,不会出现假阴性和假阳性结果.结果表明,方法特异性高,可同时筛查两个靶标基因,扩增效率在90％ ～ 110％之间,标准曲线决定系数R2＞ 0.98,确定了最低检测限为2拷贝/μL.开发和建立的二重荧光定量PCR检测技术可以实现一管多检的实际需要,降低试剂成本,缩短检测时间,为大豆及其深加工产品转基因成分的快速检测提供了有效方法,为促进食品进出口提供技术保障.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	包永华		41	111	6.0	7.0
2	陈冠武		52	141	7.0	9.0
3	叶素丹		20	47	4.0	6.0
4	王凤军		8	8	2.0	2.0