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目的:探讨人外周血内皮前体细胞(endothelial progenitor cells EPCs)体外诱导分化为内皮细胞(ECs)的生长增殖规律及其特性,以期证实人外周血是临床治疗缺血性疾病一个理想的内皮前体细胞来源.方法 密度梯度离心提取单个核细胞,接种在人纤连蛋白包被的培养板上,培养于含有促血管生长因子VEGF、b-FGF、IGF、EGF等的内皮生长基质EGM-2 MV中.每天倒置显微镜观察,并记录.4d后去除未附着细胞,继续培养黏附细胞,同时,黏附细胞用Dil-AC-LDL和FITC-UEA-1进行免疫荧光染色,荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜观察.收集第7d的黏附细胞,流式细胞仪检测细胞表面标志CD34和CD31.结果 接种1d后,一些细胞变形;2d后,有细胞团形成;3d后,细胞团周围一些贴壁细胞开始出现;4d后,黏附细胞呈短梭形或多角形贴壁生长,荧光显微镜、共聚焦激光扫描显微镜下可观察到Dil-AC-LDL和FITC-UEA-1双阳性的黏附细胞;第6d、7d,黏附细胞呈长梭形;FACS分析,CD34和CD31阳性率分别为(14.13±2.79)%、(54.67±3.44)%.结论 外周血中确实存在EPCs,并且在促血管生长因子VEGF、b-FGF、IGF、EGF等的刺激下能分化为成熟的内皮细胞.EPCs可望作为临床血管再生的细胞治疗
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文献信息
篇名 人外周血内皮前体细胞体外增殖规律的动态观察及其特性
来源期刊 医药世界 学科 医学
关键词 内皮前体细胞 分离 培养 诱导 表面标志 流式细胞仪
年,卷(期) 2007,(1) 所属期刊栏目 临床医药
研究方向 页码范围 64-66
页数 3页 分类号 Q254|R543
字数 2147字 语种 中文
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1 秦宏伟 山东济宁师范专科学校生物系 1 0 0.0 0.0
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内皮前体细胞
分离
培养
诱导
表面标志
流式细胞仪
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医药世界
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