新生大鼠松果体细胞体外分离培养及增殖情况观察

• 作者: 冯星 韩星
• 来源期刊: 中国医学创新
• 关键词: 松果体细胞 五羟色胺 微管相关蛋白-2 N-乙酰基转移酶 生长抑素 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2019,（36）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 28-33
• 页数: 6页
• 字数: 4711字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-4985.2019.36.007

摘要

目的:分离培养并鉴定新生大鼠松果体细胞,观察其体外增殖情况.方法:选择30只新生SD大鼠,处死后分离松果体组织,采用多聚赖氨酸对培养板予预包被处理胰酶消化、经差速贴壁分离等方法,对新生大鼠松果体细胞进行体外分离培养并传代.观察50 d内体外培养的松果体细胞的形态变化,培养7 d时采用免疫荧光法,观察原代松果体细胞5-羟色胺(5-HT)及微管相关蛋白-2(MAP-2),实时定量PCR法检测N-乙酰基转移酶(AANAT)及生长抑素(SS)mRNA.分别取传代第1、3、5代对数生长期细胞测定细胞增殖情况.结果:新生大鼠松果体细胞呈圆球形或多角形,培养21 d时松果体细胞体积明显增大,胞质内可见深色细小囊泡状颗粒.培养7、14、21、28 d时,随培养时间延长,松果体细胞AANAT mRNA的相对表达量逐渐降低(P<0.05),松果体细胞SS mRNA的相对表达量先升高后降低(P<0.05).细胞传代后第1、3代细胞生长曲线近似"S"形,且第3代细胞增殖最为旺盛;随传代次数增加,第5代细胞生长曲线近似平缓,细胞逐渐衰老、死亡.结论:采用胰酶消化、差速贴壁分离等方法并结合含10％胎牛血清的DMEM/F12培养基培养,可获得纯度较高且有增殖潜力的大鼠松果体细胞,细胞在体外增殖活跃,且具有一定的生物学功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯星		123	829	16.0	23.0
2	韩星		3	4	1.0	2.0