核移植方法和活化方法对小鼠体细胞克隆胚胎发育的影响

• 作者: 于洋 李雪梅 焦丽红 王二耀 王柳
• 来源期刊: 科学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 小鼠 体细胞克隆 核移植 显微操作 卵母细胞激活 发育
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 74-79
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 6225字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0023-074X.2007.01.013

摘要

用卵丘细胞为核供体进行小鼠体细胞克隆, 成功获得了一批成年体细胞克隆小鼠. 为探讨不同核移植方法和重构胚活化方法对小鼠克隆胚发育的影响, 用B6D2F1小鼠的卵丘细胞和卵母细胞作为供、受体进行核移植实验, 采用电融合和细胞质内直接显微注射的方法进行核移植, 并采用电脉冲、乙醇处理、氯化锶处理和电脉冲联合氯化锶4种不同方法对重构胚进行活化, 对克隆胚胎的体外及体内发育进行研究. 结果显示, 利用显微注射法获得重构胚胎的工作效率(90.7%)显著高于融合法获得重构胚胎的工作效率(49.7%). 乙醇、电脉冲和氯化锶3种激活方法都可以诱导孤雌胚发育到囊胚, 但前二者处理的胚胎的囊胚发育率(52.4%, 54.2%)显著低于后者(76.9%). 10 mmol/L氯化锶处理6 h活化效果最好. 融合法获得的重构胚经氯化锶或者电脉冲联合氯化锶激活后, 囊胚发育率(9.5%, 8.6%)显著高于单纯电脉冲激活(2.6%), 而乙醇活化的重构胚没有发育到囊胚阶段. 用显微注射法经氯化锶激活获得的重构胚的囊胚发育率最高(16.6%). 注射法和融合法获得的重构胚胎经氯化锶激活后进行胚胎移植, 都获得了发育到期的体细胞克隆小鼠, 发育到期率分别为 2.5%和1.4%. 结果表明, 两种核移植方法对B6D2F1 小鼠重构胚胎的早期发育能力有一定影响, 用这两种方法都可以获得体细胞克隆小鼠; 不同活化方法对重构胚胎的体外发育能力有显著影响, 在上述4种激活方式中, 氯化锶处理对克隆胚的激活效果最好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李雪梅	中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室	67	878	16.0	28.0
5	焦丽红	中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室	14	95	7.0	9.0
6	于洋	中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室	130	1477	22.0	31.0
10	王二耀	中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室	2	13	2.0	2.0