大鼠骨髓基质干细胞定向分化为成骨细胞及体外增殖过程中地塞米松的抑制性干预

• 作者: 南开辉 赵锦 马剑平 黎洪棉
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓基质干细胞 成骨细胞 地塞米松 细胞增殖 细胞分化
• 年，卷（期）: 2007,（42）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 8426-8429
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 4680字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.42.001

摘要

目的:地塞米松在体外诱导骨髓基质干细胞向成骨细胞分化过程中起着关键性作用.验证骨髓基质干细胞向成骨细胞分化的能力,观察成骨细胞分化早期地塞米松对骨髓基质干细胞体外增殖的抑制效果.方法:实验于2006-09/12在南方医科大学组织工程研究中心完成.①实验方法:取5周龄雄性SD大鼠10只,经颈椎脱位法处死后取股骨,去除双侧干骺端,用DMEM高糖完全培养基冲洗骨髓腔,收集骨髓细胞,离心后按(1-2)×107L-1密度接种,加入条件培养液(DMEM高糖完全培养基,体积分数为0.1的标准胎牛血清,50 mg/L维生素C,10 mmol/L的B-甘油磷酸钠,100 U/mL青霉素、100 U/mL链霉素)进行体外培养.分别于细胞传代培养后第0,2,4天向培养基中加入1 μmol/L地塞米松1 mL,并设立仅加入等量培养基的空白对照组.②实验评估:以2 d为间隔,倒置显微镜下观察细胞生长情况.采用Cell Titer 96试剂盒各组细胞增殖情况.结果:①骨髓基质干细胞向成骨细胞的分化:原代培养中贴壁细胞多呈长梭形,少数呈小圆形或三角形.原代培养六七天后进,行传代,多数细胞在加入地塞米松后逐渐呈均一的长梭形,随着时间延长呈叠形多层排列,细胞外基质明显增多,并逐渐形成多个小结样结构.空白对照组细胞形态欠均一,少数细胞呈多边形或三角形,细胞外基质明显少于地寒米松组,罕见小结样结构.传代后10～12 d可达80%～90%致密层,细胞生长速度较原代细胞明显增快,至第10代细胞仍未出现衰老现象.②骨髓基质干细胞的增殖检测:与空白对照组比较,细胞传代培养后第0,2,4天加入地塞米松,干预处理8,10,12 d时的细胞数量均明显下降(t=5.044 5～11.379 5,P均＜0.01).结论:①传代的骨髓基质干细胞经地塞米松处理后,细胞形态趋于成熟,生长速度加快,可定向分化为成骨细胞.②在向成骨细胞分化早期,地塞米松能够抑制骨髓基质干细胞的体外增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵锦		20	110	5.0	9.0
2	黎洪棉	南方医科大学南方医院整形外科	8	72	5.0	8.0
3	马剑平		21	26	3.0	4.0
4	南开辉	南方医科大学组织工程研究中心	2	6	2.0	2.0