小RNA干扰技术沉默Smoothened(Smo)基因表达对胃癌MGC803细胞增殖及凋亡的影响

• 作者: 刘胜军 戎祯祥 方驰华 朱达坚
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胃肿瘤 RNA干扰 脱噬作用
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 胃外科
• 页码范围: 531-533
• 页数: 3页
• 分类号: R73
• 字数: 2986字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1001-9030.2007.05.006

摘要

目的 观察Smo基因在胃癌MGC803细胞中的表达,及其对胃癌MGC803细胞增殖与凋亡的作用.方法 半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot检测胃癌MGC803细胞中Smo基因的表达;化学合成3条针对Smo mRNA的小干扰RNA(siRNA),阳性脂质体介导转染胃癌MGC803细胞,半定量RT-PCR筛选出降解胃癌MGC803细胞Smo mRNA最有效的siRNA;噻唑蓝(MTT)法和流式细胞仪检测胃癌MGC803细胞Smo mRNA被降解后,对细胞增殖和凋亡率的影响.结果 胃癌MGC803细胞内有Smo蛋白及Smo mRNA的强表达,siRNA-1、siRNA-2对胃癌MGC803细胞Smo基因表达均有降解作用,siRNA-1降解作用最明显,达61.7%,与隐性对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).siRNA-1转染胃癌MGC803细胞24 h后,细胞增殖水平较隐性对照组明显下降(P＜0.05);转染48 h后,细胞凋亡率较隐性对照组明显上升(P＜0.05).结论 胃癌MGC803细胞内存在Smo基因的高表达,降低Smo基因表达可抑制胃癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,Smo基因具有调控胃癌细胞增殖和凋亡的作用.