大鼠耳蜗感觉上皮细胞的原代培养及其意义

• 作者: 刘俊 刘贞荣 孔维佳 张丹 张亚民
• 来源期刊: 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 耳蜗 感觉上皮细胞 原代培养 毛细胞
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 27-31
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4695字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-1781.2007.01.011

摘要

目的:建立大鼠耳蜗感觉上皮细胞(CSEC)的原代培养体系,为研究毛细胞再生的分子机制提供大量来源一致的细胞.方法:取出生1 d(P1)的大鼠耳蜗感觉上皮(Corti器)作组织块培养,选择性消化抑制成纤维样细胞(FLC)生长;应用有限稀释法纯化CSEC,倒置显微镜下观察CSEC的形态、生长特征;应用细胞角蛋白18、波形蛋白、Brn3.a和Calretinin的免疫细胞化学及透射电镜等进行鉴定.BrdU标记CSEC核DNA观察CSEC有丝分裂活动.结果:培养第2天CSEC从组织块迁移出来,呈扁平、多角形、核大而圆的上皮细胞形态,细胞之间连接紧密,形成单层时呈"铺路石样"外观;FLC呈梭形"鱼群样"包绕CSEC生长,增殖速度快于CSEC.由纯化的CSEC构成的上皮单层可见由成百个CSEC包绕液体形成的dome.CSEC表达毛细胞的特征性标志物,证实培养的CSEC具有毛细胞前体细胞的特征;并通过有丝分裂活动产生新的细胞即毛细胞样细胞.结论:体外培养的CSEC表达毛细胞特征性标志物,具有毛细胞前体细胞的特征.CSEC原代培养体系的建立,为进一步探讨毛细胞再生的分子机制提供了实验条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孔维佳	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	278	1805	21.0	28.0
2	刘俊	浙江省中医院耳鼻咽喉科	14	8	2.0	2.0
3	张丹	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	67	293	8.0	15.0
4	张亚民	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	2	1	1.0	1.0
5	刘贞荣	湖北省黄石市第一医院创伤外科	1	0	0.0	0.0