DN-hTERT对MCF7细胞端粒酶活性及细胞生长的抑制作用

• 作者: 刘慧娟 奚玲 王拥军 饶耀剑
• 来源期刊: 中国肿瘤临床
• 学科: 医学
• 关键词: DN-hTERT MCF7 端粒酶活性
• 年，卷（期）: 2007,（14）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 785-788
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3067字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8179.2007.14.002

摘要

目的:观察端粒酶逆转录酶负突变体(DN-hTERT)对乳腺癌细胞MCF7端粒酶活性和恶性表型的抑制作用.方法:将带DN-hTERT基因的真核表达载体(DN-hTERT-IRES2-EGFP,DN)、IRES2-EGFP空载体(Ⅰ)通过脂质体2000(lipofectamine2000)介导转入MCF7细胞,以G418进行稳定筛选,得到阳性克隆;倒置荧光显微镜观察转染细胞的生长情况;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染细胞hTERTmRNA的表达;TRAP-ELISA方法检测转染细胞端粒酶活性;流式荧光原位杂交法(FLOW-FISH)检测转染细胞端粒长度的变化;裸鼠肿瘤细胞移植观察转染细胞动物致瘤率.结果:MCF7细胞转染DN-hTERT后生长受到抑制;转染DN-hTERT的MCF7细胞(MCF7/DN)hTERT mRNA表达升高;TRAP-ELISA检测MCF7/DN细胞端粒酶活性(2.36±0.12)与转染空载体MCF7细胞(MCF7/I)(3.32±0.14)比较显著降低(P＜0.05);反应端粒长度的荧光强度差比较中,MCF7/DN细胞(13.89±0.23)比MCF7/I(19.87±0.36)低,转染DN端粒长度出现缩短;裸鼠肿瘤细胞移植,2周动物致瘤率MCF7/DN为0,与MCF7/I的35%比较有极显著意义(P＜0.01).结论:DN-hTERT能特异性抑制MCF7细胞生长和端粒酶活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王拥军	上海中医药大学附属龙华医院脊柱病研究所	250	3067	29.0	44.0
2	奚玲	华中科技大学附属同济医院肿瘤生物医学中心	25	100	6.0	9.0
3	饶耀剑	河南省正骨研究院脊柱外科	2	3	1.0	1.0
4	刘慧娟	河南省正骨研究院脊柱外科	2	3	1.0	1.0