大鼠间充质干细胞的体外分离培养及CFSE标记

• 作者: 付霞霏 何援利
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 二醋酸盐琥珀酰亚胺酯 生物学标记 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 464-466
• 页数: 3页
• 分类号: R329.24
• 字数: 2563字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2007.05.017

摘要

目的 探讨体外分离、培养及荧光染料CFSE标记大鼠间充质干细胞(MSCs)的方法.方法 Wistar大鼠10只.用密度梯度离心及贴壁法相结合的方法分离纯化大鼠MSCs并进行鉴定.荧光染料CFSE标记MSCs,荧光显微镜检测标记率,CCK-8法检测标记细胞的增殖能力.结果 原代MSCs 72h贴壁,呈梭形,集落样生长;传代后,细胞变为形态均一,排列有序的成纤维细胞样.CFSE标记当天,荧光显微镜下大鼠MSCs呈明亮的绿色荧光,标记率达100%,随着培养时间延长,荧光强度逐渐减弱,标记率随之下降,标记4周后,标记率下降至78%;标记细胞的增殖能力与未标记细胞相比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 利用密度梯度离心法结合贴壁法可以获得比较纯的MSCs;CFSE短期标记MSCs效率很高,且标记细胞的增殖能力不受影响,但荧光强度及标记率随着时间延长而下降.