小干扰RNA抑制胃癌细胞株葡萄糖调节蛋白Grp78的表达

• 作者: 吴德全 张新晨 徐华锋 杨宝峰 杨维良
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胃癌 RNA干扰 葡萄糖调节蛋白 逆转录-聚合酶链反应 免疫荧光技术
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 447-452
• 页数: 6页
• 分类号: R9
• 字数: 5095字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2007.05.003

摘要

目的:观察Grp78靶向RNA干扰质粒载体对人类胃癌细胞株7901 Grp78基因表达的抑制作用.方法:设计1对Grp78基因发卡寡核苷酸,并与psiSTRIKETM质粒载体连接,构建受控于人RNA聚合酶Ⅲ启动子U6的真核表达载体,将重组质粒导入人类胃癌细胞株7901内,分别在转染前、转染后24,48和72 h通过RT-PCR、免疫荧光技术检测Grp78 mRNA及蛋白水平的表达情况.结果:成功构建RNA干扰质粒载体,靶向Grp78干扰质粒载体命名为p siSTRIKETM/Grp78.将上述质粒转染到人类胃癌细胞株后,观察到Grp78 mRNA及蛋白水平的表达明显下调,随着时间的延长Grp78在实验组中的表达逐渐降低,并随着时间推移稳定存在.阴性对照组,转染前组,转染12,48,72 h组Grp78的mRNA相对表达量分别为1.069,0.972,0.662,0.408,0.420.转染后组较转染前组及阴性对照组分别具有显著性差异(P＜0.01),转染前与阴性对照组无显著性差异(P＞0.05).转染前后组免疫荧光表达结果统计学差异明显(P＜0.001),其中转染后48 h同转染后24 h相比较Grp78蛋白表达明显减少(P＜0.00714).结论:构建的RNA干扰真核表达载体psiSTRIKETM/Grp78能明显抑制Grp78 mRNA及蛋白的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴德全	哈尔滨医科大学附属第二医院普通外科	116	681	13.0	21.0
2	杨维良	哈尔滨医科大学附属第二医院普通外科	272	1831	21.0	28.0
3	杨宝峰	哈尔滨医科大学药理学教研室	237	2632	27.0	41.0
4	张新晨	哈尔滨医科大学附属第二医院普通外科	75	714	16.0	24.0
5	徐华锋	黑龙江大学生命科学院	7	87	4.0	7.0