应用TT法测定家兔尿液中重组水蛭素浓度的方法学研究

• 作者: 任洪灿 吕莉 周峰 王一楠 罗轶 闫宇辉 陈晓芳 韩国柱
• 来源期刊: 药物分析杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 重组水蛭素 家兔 凝血酶时间(TT) 尿药排泄 药动学 生物测定法
• 年，卷（期）: 2007,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1386-1389
• 页数: 4页
• 分类号: R917
• 语种: 中文

摘要

目的:建立一种生物测定法--凝血酶时间法(TT法),以测定家兔尿液中的重组水蛭素(rH),进而研究其尿药排泄动力学.方法:依据rH的抗凝血酶活性,采用TT法测定家兔尿中的rH浓度.取家兔尿液10 μL,依次加入空白血浆40 μL、pH 7.4的Tris-HCl缓冲液50 μL,以及5 u·mL-1的凝血酶溶液50 μL,由血凝仪记录凝血时间并计算凝血时间延长百分率,从标准曲线求出待测尿液中的rH浓度.结果:TT延长百分率(Y)经对数转换与尿液中rH浓度(X,μg·mL-1)呈线性相关,线性方程为Y=0.7598X+1.0098,r=0.9956,线性范围0.49～2.50 μg·mL-1,最低检测限为0.49 μg·mL-1.高、中、低3种浓度rH尿液标准溶液测得的日内精密度RSD小于8.10%,日间精密度RSD小于9.07%,回收率为95.6%～97.7%,稀释回收率大于95.6%(5～200倍稀释)和91.9%(500倍稀释).水蛭素尿液标准溶液冰冻(-20℃)保存至少半月内稳定,0～4℃及室温保存至少8 h内稳定,-20℃及室温反复冻融3次稳定.3只家兔iv rH 1.0 mg·kg·1后不同时间段收集尿液,应用TT法测定其rH浓度,经亏量法求得rH的消除半衰期为65.4 min,其log(Xu∞-Xut)-t作图符合尿药排泄动力学曲线.结论:应用TT法测定家兔尿中的rH浓度,方法特异性高、精密度好、回收率高、线性好,结果准确可靠,可用于家兔尿中rH浓度的测定和尿药排泄动力学的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕莉	大连医科大学药理教研室	50	300	9.0	14.0
2	韩国柱	大连医科大学药理教研室	106	1001	15.0	27.0
3	周峰	大连医科大学药理教研室	24	91	6.0	8.0
4	王一楠	大连医科大学药理教研室	4	12	1.0	3.0
5	闫宇辉	大连医科大学药理教研室	2	1	1.0	1.0
6	任洪灿	大连医科大学药理教研室	6	46	4.0	6.0
7	罗轶	大连医科大学药理教研室	4	11	1.0	3.0
8	陈晓芳	大连医科大学药理教研室	2	10	1.0	2.0