抗转化生长因子β1的U1 snRNA嵌合型核酶体外剪切作用

• 作者: 刘芳 吴耀辉 张敏 邹萍
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 转化生长因子β RNA,催化 U1小核RNA嵌合酶
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1609-1612
• 页数: 4页
• 分类号: R363
• 字数: 3260字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2007.08.037

摘要

目的:研究抗转化生长因子β1 U1snRNA嵌合型锤头状核酶的细胞外切割活性.方法:通过计算机设计针对TGFβ1的锤头状核酶,然后把合成的核酶片段克隆入含有U1 snRNA启动子/增强子和终止子的U1 snRNA核酶载体中.通过RT-PCR扩增获得TGFβ1的部分基因片段,将其克隆入T载体中T7启动子的下游,体外转录获得核酶和靶RNA,转录过程中掺入同位素,通过变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化回收.[32p]标记的核酶与靶RNA在不同条件下进行切割反应,变性PAGE电泳,放射自显影,分析反应结果.结果:活性的U1 snRNA嵌合型核酶(U1Rz803)在生理温度下具有良好特异的切割活性;而点突变型核酶U1Rz803m没有切割活性,因此这些结果显示U1Rz803设计是正确的.结论:本研究中制备的U1Rz803具有良好的特异催化切割活性.U1 snRNA嵌合型核酶U1Rz803有望在胞内抑制TGFβ1的表达,为研究转化生长因子(TGF)β1在造血调控中的作用机制提供有效工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹萍	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所	258	977	13.0	18.0
2	刘芳	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所	157	1393	20.0	30.0
3	张敏	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所	197	1492	20.0	32.0
4	吴耀辉	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所	22	60	4.0	6.0