转化生长因子-β1基因RNAi质粒载体的构建与鉴定

• 作者: 卢伟 周为军 唐湘祁 汤建光 王翔 胡治平
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: RNAi 转化生长因子-β1 质粒载体
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 22-26
• 页数: 5页
• 分类号: R246.6
• 语种: 中文

摘要

目的 构建人转化生长因子-β1(TGFβ1)基因RNAi质粒载体.方法 根据人TGFβ1 mRNA序列选择3个靶序列并设计合成相应3对寡核苷酸序列,同时合成1对阴性对照寡核苷酸序列;将以上4对寡核苷酸序列退火后连入pRNA-U6.2/Lenti质粒并分别命名为pRNA-U6.2/Lenti-1、pRNA-U6.2/Lenti-2、pRNA-U6.2/Lenti-3、pRNA-U6.2/Lenti-4.酶切和测序鉴定后,将以上重组质粒转染Hela细胞,运用RT-PCR和ELISA检测TGFβ1 mRNA和蛋白的表达水平.结果 酶切和测序证实目的 寡核苷酸片段已被准确克隆到pRNA-U6.2/Lenti质粒;与对照组相比,pRNA-U6.2/Lenti-1、pRNA-U6.2/Lenti-2转染Hela细胞后,TGFβ1 mRNA水平及蛋白水平的表达量均受到明显抑制;其中TGFβ1蛋白水平在pRNA-U6.2/Lenti-1组下降79.2%,在pRNA-U6.2/Lenti-2组下降53.7%,统计有显著性差异(P＜0.01).结论 成功构建了人TGFβ1基因RNAi质粒载体,对于TGFβ1高表达疾病的基因治疗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡治平	中南大学湘雅二医院神经内科	105	364	9.0	13.0
2	王翔	中南大学湘雅二医院神经内科	81	215	8.0	10.0
3	唐湘祁	中南大学湘雅二医院神经内科	19	224	6.0	14.0
4	汤建光	中南大学湘雅二医院神经内科	21	65	5.0	6.0
5	卢伟	中南大学湘雅二医院神经内科	40	188	7.0	11.0