人神经生长因子重组腺伴随病毒载体的构建

• 作者: 刘淼 杨广笑 王全颖 马巍
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: hNGF基因 重组腺伴随病毒(rAAV) 基因转移
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 226-228
• 页数: 3页
• 分类号: R749.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8259.2004.03.006

摘要

目的为了研究人神经生长因子(hNGF)基因导入急性脊髓损伤(SCI)模型的治疗作用,构建并产生重组腺伴随病毒(AAV)载体.方法将hNGF外源性核酸片段插入AAV-shuffer质粒pSSHG-Neo的KpnⅠ-BamHⅠ位点构建AAV.用腺病毒辅助质粒pFG140代替野生型腺病毒,包装质粒pAAV/Ad及已构建的pSSHG-Neo三质粒磷酸钙共沉淀法在肾胚胎293细胞系中同源重组包装rAAV.使用地高辛标记的斑点杂交方法测定重组病毒滴度.结果成功构建了重组病毒质粒pSSHG/hNGF,经蔗糖梯度离心法获得rAAV组分,梯度稀释测得滴度为1.46×1012 PFU·mL-1.结论成功地制备了人神经生长因子重组腺伴随病毒(rAAV/hNGF)载体,为SCI基因治疗实验奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王全颖		62	151	5.0	8.0
2	杨广笑		67	148	5.0	7.0
3	马巍	西安交通大学第一医院骨科	60	322	9.0	16.0
4	刘淼	西安交通大学第一医院骨科	100	812	15.0	23.0