人神经生长因子重组慢病毒载体构建及检测

• 作者: 刘海涛 吴建红 夏术阶 张飞 杜义恒
• 来源期刊: 神经损伤与功能重建
• 学科: 医学
• 关键词: 神经生长因子 慢病毒载体 糖尿病神经源性膀胱
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 361-364
• 页数: 4页
• 分类号: R741|R694+.5
• 字数: 2844字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/sjsscj.2014.05.001

摘要

目的：构建含神经生长因子（NGF）基因的重组慢病毒载体，并在293T细胞中验证NGF是否可以过表达。方法：将NGF基因克隆至慢病毒穿梭质粒Ubi-MCS-3FLAG-SV40-EGFP，然后利用酶切鉴定、PCR鉴定及测序验证后，同两个辅助质粒共转染到293T细胞中，构建重组慢病毒载体。重组慢病毒感染293T细胞，通过荧光检测慢病毒的转染效果，用Western Blot检测NGF基因的表达。结果：酶切鉴定、PCR扩增鉴定和对重组慢病毒进行测序，提示重组慢病毒构建正确。荧光显微镜观察重组慢病毒感染的293T细胞，可见强荧光。Western Blot结果提示目的基因可正常表达。RT-PCR测得病毒滴度达到可利用标准。结论：人NGF重组慢病毒载体构建成功。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴建红	上海交通大学附属第一人民医院泌尿外科	3	7	1.0	2.0
2	夏术阶	上海交通大学附属第一人民医院泌尿外科	170	1141	17.0	25.0
3	张飞	上海交通大学附属第一人民医院泌尿外科	25	320	7.0	17.0
4	刘海涛	上海交通大学附属第一人民医院泌尿外科	82	498	12.0	18.0
5	杜义恒	上海交通大学附属第一人民医院泌尿外科	3	2	1.0	1.0