抗前列腺癌多肽的可溶性表达及纯化

• 作者: 李斌 李立文 苏明权 郝晓柯
• 来源期刊: 陕西医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 前列腺肿瘤/诊断 肽类/代谢
• 年，卷（期）: 2007,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1137-1139
• 页数: 3页
• 分类号: R9
• 字数: 2736字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7377.2007.09.010

摘要

目的:探讨抗前列腺癌多肽的可溶性融合蛋白的表达条件,并获得其纯化蛋白,为后续的体内、外活性实验奠定基础.方法:采用Phamacia公司商品化的GST融合表达载体pGEX-4T-2,向细菌培养基中加入IPTG后,诱导Ptac启动子下游的外源目的基因表达.通过对不同培养基、不同温度、不同诱导时间及不同诱导剂浓度下可溶性目的蛋白的表达量进行探索,筛选出表达量最高的组合方式,并通过GST亲合层析柱GSTrap FF对获得的可溶性蛋白进行纯化.结果:成功进行了GST-APP216融合蛋白的可溶性表达,在IPTG浓度为0.2 mmol/L,27℃条件下,诱导表达4.5h时表达量最高.经凝胶成像系统进行密度扫描显示,该可溶性蛋白的表达量约占上清总蛋白量的36.2%.并获得了纯化的APP216蛋白,经紫外分光光度计测定标准品,绘制标准曲线.测定260/280nm处吸光度的比值,得到纯化蛋白的浓度为323.1μg/ml.结论:APP216纯化蛋白的获得,为进一步检测抗前列腺癌多肽体外、体内的肿瘤杀伤作用奠定了坚实的实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郝晓柯	第四军医大学西京医院检验科	322	1751	18.0	23.0
2	李斌	第四军医大学唐都医院检验科	93	574	12.0	21.0
3	苏明权	第四军医大学西京医院检验科	226	1052	14.0	20.0
4	李立文	第四军医大学西京医院全军骨科研究所	30	110	5.0	7.0