人乳头瘤病毒-黑色素瘤抗原细胞毒T淋巴细胞表位嵌合基因克隆及其表达

• 作者: 张丽芳 张德意 朱冠保 许晓东
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 黑色素瘤抗原 表位 疫苗
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 大肠外科
• 页码范围: 923-925
• 页数: 3页
• 分类号: R73
• 字数: 3279字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1001-9030.2007.08.009

摘要

目的 构建人乳头瘤病毒(HPV)6b型结构蛋白L1-黑色素瘤抗原(MAGE-A3)细胞毒T淋巴细胞(CTL)表位嵌合基因并表达目的蛋白,为下一步制备HPV6bL1/MAGE-A3-CTL嵌合疫苗提供理论基础和实验依据.方法 将MAGE-A3 CTL表位基因插入到HPV6bL1的羧基端序列中,将目的基因连入真核表达转移载体pFastBacTM1,构建重组质粒pFastBacTM1/HPV6bL1/MAGEA3-CTL,转化DH10Bac感受态细胞,获得重组杆状病毒Bacmid/HPV6bL1/MAGE-A3-CTL;将重组杆状病毒转染sf-9昆虫细胞表达嵌合目的蛋白,并经SDS-Page电泳、考马斯亮蓝染色及Western blot分析鉴定.结果 成功构建了重组质粒pFastBacTM1/HPV6bL1/MAGE-A3-CTL,获得了重组杆状病毒Bacmid/HPV6bL1/MAGE-A3-CTL,并在真核细胞sf-9昆虫细胞中成功表达了嵌合目的蛋白.结论 通过基因克隆方法能成功的将MAGE-A3 CTL表位基因插入到HPV6bL1基因中,并能在真核细胞表达系统中表达出嵌合目的蛋白,为进一步制备HPV6bL1/MAGE-A3-CTL嵌合疫苗提供理论基础和实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱冠保	温州医学院附属第一医院胃肠外科	78	317	11.0	13.0
2	张丽芳	温州医学院微生物与免疫教研室	74	280	10.0	11.0
3	张德意	温州医学院附属第一医院胃肠外科	2	6	2.0	2.0