从Raji细胞克隆IL-10基因

• 作者: 劳风学 李明 陈其新
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: IL-10 Raji 克隆 序列分析
• 年，卷（期）: 2007,（36）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 11764-11765,11781
• 页数: 3页
• 分类号: Q785
• 字数: 2134字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2007.36.023

摘要

[目的]探索一种简便可行的白细胞介素-10(IL-10)基因的克隆方法.[方法]以人Burkitt's淋巴瘤细胞系Raji细胞为材料,提取培养的Raji细胞中的总RNA.根据GenBank中人IL-10基因序列设计1对特异性引物,用RT-PCR方法扩增人IL-10基因的编码cDNA.回收目的片段,将其与pMD18-T载体连接并转化到大肠杆菌感受态细胞DH5α,构建该基因的重组质粒.重组质粒经PCR和双酶切鉴定后进行测序.[结果]以骨髓细胞组织总RNA为模板进行RT-PCR,可从Raji细胞中获得了预期的约550 bp特异性条带.成功构建了IL-10基因的重组质粒,PCR扩增和双酶切的鉴定结果说明该插入片段可能为IL-10 cDNA.从获得的阳性克隆中挑选1个菌落来分析重组质粒的插入DNA片段序列.序列分析结果证实其与报道的IL-10基因的序列一致.[结论]该研究为IL-10的重组表达及其生物学活性分析奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李明		76	525	11.0	19.0
2	陈其新		31	114	7.0	8.0
3	劳风学		1	0	0.0	0.0