大鼠肝卵圆细胞增殖模型的重建及免疫组织化学定位

• 作者: 沈建伟 王继亮
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 肝细胞 大鼠 免疫组织化学
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 405-407,411,后插页1
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 5789字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.03.003

摘要

目的:拟改良常用的大鼠肝卵圆细胞增殖模型Solt-Farber建模方法,并对肝卵圆细胞的生物学特性和免疫组织化学定位进行分析.方法:实验于2004-09/2005-09在华中科技大学同济医学院完成.①分组:选用体质量180 g左右的雄性SD大鼠120只,随机分为5 mg/kg 2-乙酰氨基芴处理组,20 mg/kg 2-乙酰氨基芴处理组及空白对照组,每组40只.②造模及给药:对Solt-Farber造模方法进一步改进:5 mg/kg,20 mg/kg 2-乙酰氨基芴处理组分笼饲养1周后通过胃管灌喂2-乙酰氨基芴,1次/d,连续3 d,按20 mg/kg剂量给予,第4天行2/3肝切除(手术当日不灌喂2-乙酰氨基芴),第5天继续灌喂,剂量分别按5 mg/kg,20 mg/kg给予,术后连续灌喂7 d.空白对照组除给予生理盐水灌喂外,不予以其他任何处理.③分别于术后第2,5,8,11,14天处死大鼠.观察大鼠肝脏标本的大体变化,留取肝组织行苏木精-伊红染色,免疫组化染色观察肝卵圆细胞增殖情况和肝卵圆细胞定位.结果:①5 mg/kg,20 mg/kg 2-乙酰氨基芴处理组大鼠术后肝脏均表现为明显充血,肝脏边缘圆钝.从术后第5天起处死的大鼠肝脏表面可见针尖样细小颗粒,呈局灶性,偶见肝脏有小出血点.②5 mg/kg,20 mg/kg 2-乙酰氨基芴处理组大鼠肝组织内可见明显的卵圆细胞增殖.两组肝卵圆细胞增殖数量比较差异无显著性(P＞0.05).空白对照组大鼠肝组织内未见到肝卵圆细胞.③肝卵圆细胞形态学特征:细胞体积小于肝细胞,体积相当于肝细胞的1/4～1/3;细胞大小及体积不均一,差异较大;形态多为卵圆型,多排列成小腺管样结构或成簇或散在分布.④肝卵圆细胞OV6,CK19,AFP,C-kit,CD34染色呈阳性.结论:①采用术前短时间大剂量,术后长时间小剂量的实验设计方案可以使建立模型所需时间进一步缩短,动物的耐受性明显好转,增殖效果却同样理想,证明大鼠肝卵圆细胞增殖模型改进成功.②在肝卵圆细胞主要位于肝实质细胞和胆管上皮细胞相结合部或其附近.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王继亮	华中科技大学附属协和医院外科	29	83	5.0	7.0
2	沈建伟	天津市第五中心医院外科	12	79	4.0	8.0