摘要:
目的:观察褪黑素对自身免疫性肝炎大鼠模型外周血淋巴细胞亚群的影响方法:实验于2004-10/2006-10在解放军第一二三医院南京军区肝病中心实验室完成.①实验材料:Wistar大鼠,雄性,3月龄,体质量(230±20)g,购自上海斯莱克实验动物有限责任公司.褪黑素:美国Sigma公司产品,临用前以无水乙醇溶解,再加生理盐水配制,使乙醇浓度为0.1%,置4℃冰箱保存备用.②实验方法:采用弗氏完全佐剂加肝细胞特异性脂蛋白法制作大鼠自身免疫性肝炎模型.将建模成功大鼠随机分为模型对照组、褪黑素注射组及猪促肝细胞生长素注射组,每组20只.褪黑素注射组褪黑素2 mg/kg腹腔注射,1次/d,猪促肝细胞生长素注射组2 mg/kg猪促肝细胞生长素腹腔注射,1次/d,模型对照组与正常对照组均用含0.01%乙醇的生理盐水腹腔注射.③实验评估:60 d后检测各组大鼠外周血淋巴细胞亚群浓度.结果:①CD4+细胞≤39.5%18只,均为褪黑素注射组动物,肝炎组织活动性指数≤8分.22只CD4+细胞>39.5%动物中,4只肝炎组织活动性指数≤8分,其中2只为褪黑素注射组动物,2只为模型对照组动物.18只肝炎组织活动性指数>8分,均为模型对照组动物.②18只CD4+细胞≤39.5%褪黑素注射组动物中,17只肝纤维化指数≤4分,1只肝纤维化指数4分;22只动物CD4+细胞>39.5%,2只肝纤维化指数≤4分,为模型对照组动物,20只肝纤维化指数>4分,褪黑素注射组2只,模型对照组18只.③CD4+细胞≤39.5%,肝组织血管病变均为1级,>39.5%时,2级以上血管病变为90.9%.18只CD4+细胞≤39.5%褪黑素注射动物血管病变为1级.22只CD4+细胞百分比>39.5%,2只血管病变为1级,为模型对照动物,17只血管病变为2级,褪黑素注射组2只,模型对照组15只.3只血管病变为3级,为模型对照动物.④CD4+细胞≤39.5%时,83.3%血管内皮细胞生长因子表达呈弱阳性,CD4+细胞>39.5%时,81.8%血管内皮细胞生长因子表达呈强阳性,提示CD4+细胞与血管内皮细胞生长因子表达有关.⑤模型对照组外周血CD4+细胞数和CD4+/CD8+比值均明显高于其他组(P<0.05),CD8+细胞与其他组无明显差异(P>0.05).褪黑素注射动物与猪促肝细胞生长素注射动物相比,无明显差异(P>0.05).结论:褪黑素对自身免疫性肝炎模型大鼠外周血CD4+细胞有较强的抑制作用.