碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子β1诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为心肌细胞的作用比较

• 作者: 刘建华 张祥忠 罗伟琼 陈嘉榆 陈运贤
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间质干细胞 碱性成纤维细胞生长因子 转化生长因子β1 细胞分化 大鼠
• 年，卷（期）: 2007,（20）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 3968-3971
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 5640字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.20.031

摘要

目的:对比观察碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子β1促进大鼠骨髓间质干细胞分化为心肌细胞的作用.方法:实验于2005-12/2006-07在中山大学干细胞与组织工程中心实验室进行.实验材料:清洁级大鼠由中山大学实验动物中心提供(SCXR(粤)2004-0011,粤监证字2004A089),三四周,大约50 g.实验方法:①分离培养大鼠骨髓间质干细胞,并采用流式细胞仪鉴定.②取第3代骨髓间质干细胞,以1×107L-1接种于24孔培养板和六孔板中,24 h后换液并分组:对照组:仅仅更换培养液;5-氮胞苷诱导组:10μmol/L 5-氮胞苷孵育24 h后更换新鲜培养液;5-氮胞苷+碱性成纤维生长因子诱导组:10μmol/L 5-氮胞苷孵育24 h后更换含10μg/L碱性成纤维生长因子的新鲜培养液;5-氮胞苷+转化生长因子β1诱导组:10μmol/L 5-氮胞苷孵育24 h后更换含10μg/L转化生长因子β1的新鲜培养液.以后每3 d换液1次,前2组换完全培养基,后2组分别换含10μg/L碱性成纤维生长因子和10μg/L转化生长因子β1的完全培养基.③30 d后应用RT-PCR法检测心肌细胞转录因子GATA-4、结蛋白表达,免疫细胞化学染色法检测细胞心肌肌钙蛋白,并在倒置显微镜下观察细胞跳动情况.结果:①骨髓间质干细胞的生长特性及鉴定:原代培养大鼠骨髓质干细胞3 d后镜下可见有细胞贴壁,形成克隆,七八天长满,随着换液和传代,细胞逐渐纯化,第3代细胞形成均一的长梭形,流式细胞仪检测发现CD44、CD29表达阳性,CD45、CD11b表达阴性.②骨髓间质干细胞向心肌细胞的分化:大鼠骨髓间质干细胞经5-氮胞苷、5-氮胞苷+碱性成纤维生长因子或5-氮胞苷+转化生长因子β1诱导30 d后,有部分细胞心肌肌钙蛋白表达阳性,GATA-4和结蛋白表达明显增强.镜下观察5-氮胞苷+碱性成纤维生长因子诱导组所诱导细胞变细、胞体伸长,呈心肌样细胞跳动,并较其他两组明显,心肌肌钙蛋白阳性细胞的比率较高(P＜0.05).结论:碱性成纤维生长因子在体外有协同5-氮胞苷促进大鼠骨髓间质干细胞分化为心肌细胞的作用,而转化生长因子β1无此作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张祥忠	中山大学附属第一医院血液内科	42	237	7.0	14.0
2	陈嘉榆	广东省广州市十二人民医院内科	10	17	3.0	4.0
3	刘建华	中山大学干细胞与组织工程中心	33	270	10.0	15.0
4	陈运贤	中山大学干细胞与组织工程中心	103	836	15.0	24.0