经脾胰岛移植治疗糖尿病大鼠的可行性

• 作者: 刘永锋 张佳林 李铁民 程颖 赵宁
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 胰岛 移植 糖尿病
• 年，卷（期）: 2007,（16）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 3026-3030
• 页数: 5页
• 分类号: R617
• 字数: 5862字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.16.008

摘要

目的:探讨经脾胰岛移植治疗糖尿病大鼠的疗效及可行性,建立稳定的胰岛移植新途径.方法:实验于2004-03/2005-03在中国医科大学附属第一医院完成.实验分组:供受鼠均采用Wistar大鼠,供鼠40只,受鼠20只.受鼠随机分为移植组、糖尿病组,每组10只.并另取10只正常大鼠作为正常组,进行对照.实验过程:①受鼠造模:移植前14 d,采取链尿霉素化学灼伤法(2%链尿霉素,65 mg/kg,腹腔注射)造成糖尿病大鼠模型(连续3 d在非禁食情况下,血糖＞16.8 mmol/L为造模成功).②供鼠胰岛分离纯化:采用明尼苏达大学改良方法,原位直接灌注消化分离大鼠胰岛.消化的胰腺组织离心,经80目不锈钢筛网过滤后,采用25%,23%,20.5%,11%Ficoll和Hank's液梯度密度离心(4℃,3 000 r/min×10min),于23%,11%层交界间吸取胰岛细胞.经Hank's液洗3次,备用.③经脾胰岛移植:移植组大鼠戊巴比妥麻醉后,经左侧肋缘下切口暴露脾脏.显微镜下手检600～800当量胰岛,以1 mLCMRL1066培养液稀释,用10 mL注射器直接经脾缓慢输注.糖尿病对照组大鼠注射生理盐水1 mL.实验评估:①胰岛双硫腙染色与计数,计算纯化率.②体外葡萄糖刺激实验检测胰岛功能.③移植术后监测血糖、血清胰岛素水平.于术后10 d行静脉糖耐量实验.④术后14 d切取受体大鼠肝脏和脾脏苏木精-伊红染色及Insulin-6免疫组化染色观察组织形态学变化.结果:①每只供鼠可分离300～400当量胰岛,纯度达85%～90%.②体外葡萄糖刺激实验显示胰岛素刺激指数平均为5.59+0.62,功能良好.③受体糖尿病大鼠术后3～5 d空腹血糖降至3.4～5.4 mmol/L(平均4.8 mmol/L).胰岛素分泌亦达到正常水平.④移植组糖耐量曲线与正常大鼠相似,K值与正常非糖尿病大鼠差异无显著性(2.802,2.3,P＞0.05).⑤受体大鼠脾脏和肝脏内可见散在的移植胰岛.结论:①移植术后3～5 d移植胰岛分泌的胰岛素可使空腹血糖达到正常水平.②经脾移植克服了门静脉直接移植引起的出血和门静脉高压的缺点,移植容量可达1 mL,可用10 mL注射器进行输注,避免反复离心、挤压,可减少胰岛体外损失,是胰岛移植的可行途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘永锋	中国医科大学附属第一医院器官移植科	194	1003	14.0	22.0
2	张佳林	中国医科大学附属第一医院器官移植科	60	155	6.0	9.0
3	李铁民	中国医科大学附属第一医院器官移植科	17	61	5.0	6.0
4	程颖	中国医科大学附属第一医院器官移植科	82	365	8.0	16.0
5	赵宁	中国医科大学附属第一医院器官移植科	86	346	9.0	13.0