反义蛋白激酶Cγ寡核苷酸对原代培养大鼠脑神经元蛋白激酶Cγ mRNA表达与皮质和海马神经元增殖及神经突起生长的影响

• 作者: 万丽 田玉科 罗爱林
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: Lipofectamine 神经元 PKCγ AsODN SODN 增殖
• 年，卷（期）: 2007,（24）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 4718-4721
• 页数: 4页
• 分类号: R745.1
• 字数: 5177字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.24.020

摘要

目的:观察阳离子脂质体Lipofectamine介导的蛋白激酶Cγ AsODN对原代培养大鼠脑神经元蛋白激酶Cγ mRNA表达及生长的影响.方法:实验于2004-03/08在华中科技大学同济医学院附属同济医院完成.①实验分组:取新生50只SD乳鼠大脑皮质及海马神经元进行原代培养,分为正常对照组,空脂质体转染组,300 nmol/L Lipofectamine-SODN转染组,100 nmol/LLipofectamine-AsODN转染组,300 nmol/L Lipofectamine-AsODN转染组,每组10瓶.②实验方法:培养第4～5天采用脂质体或脂质体包裹的不同浓度的AsODN或SODN蛋白激酶Cγ转染培养神经元.③实验评估:采用倒置显微镜对神经元的生长进行动态观察;免疫组化ABC法进行蛋白激酶Cγ阳性神经元的鉴定;MTT法检测神经元的增殖率;RT-PCR方法检测转染后神经元的蛋白激酶Cγ mRNA的表达变化.结果:①蛋白激酶Cγ阳性神经元呈胞浆内棕褐色染色,胞核不显色.②蛋白激酶Cγ AsODN转染早期呈现促进神经元突起生长,胞体分化的作用.随着反义浓度增加,相对生长指数值升高.而在转染晚期,ASODN蛋白激酶Cγ转染组凋亡率均明显增加.③AsODN蛋白激酶Cγ可降低神经元蛋白激酶Cγ mRNA的表达.结论:蛋白激酶Cγ AsODN可减少神经元蛋白激酶Cγ mRNA的表达,并刺激皮质及海马神经元的增殖及神经突起的生长,这可能与蛋白激酶Cγ对神经元的生长起负性调控作用有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田玉科	华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科	218	1564	18.0	31.0
2	罗爱林	华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科	145	839	14.0	21.0
3	万丽	广州医学院第二附属医院麻醉科	21	44	4.0	5.0