TAIL-PCR方法扩增稀有放线菌小单孢菌中ΦC31的attB序列研究

• 作者: 李晓华 杨梦莹 龙慈凡
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 小单孢菌40027菌株 TAIL-PCR attB序列
• 年，卷（期）: 2007,（22）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 6729,6732
• 页数: 2页
• 分类号: Q81
• 字数: 1144字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2007.22.020

摘要

[目的]为了研究链霉菌噬菌体諧31在小单孢菌40027菌株中的整合位点序列.[方法]以20 ng整合质粒pSET152的小单孢菌40027菌株基因组DNA为模板,利用3个特异性巢式引物(PF1、PF2和PF3)与随机引物AD2,通过热不对称交错PCR(TAIL-PCR)扩增稀有放线菌小单孢菌中Φ31的attB序列,用1%琼脂糖凝胶电泳来检测扩增产物的大小.[结果] 扩增结果表明,第三轮扩增产物250 bp左右的条带比第二轮对应带略小,第二轮扩增产物对应带比第一轮对应带略小,与3个特异性巢式引物预期扩增结果相符,第三轮扩增产物250 bp左右那一条带为阳性带, 经回收后,进行克隆并测序.序列分析表明:该阳性带包含Φ31在小单孢菌40027菌株中的attB序列.[结论] TAIL-PCR方法为attB序列的克隆提供了一种简便、高效的新方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李晓华	中南民族大学生命科学学院国家民委生物技术重点实验室	37	156	7.0	9.0
2	龙慈凡	中南民族大学生命科学学院国家民委生物技术重点实验室	6	35	3.0	5.0
3	杨梦莹	中南民族大学生命科学学院国家民委生物技术重点实验室	7	12	2.0	3.0