饲养层FGF2表达量对猕猴胚胎干细胞自我更新及多能性的影响

• 作者: 卢斌 季维智 张敬 李荣荣 王喜宏 陈永昌 陈洪伟 魏强
• 来源期刊: 动物学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 猕猴 FGF2 饲养层 胚胎干细胞 增殖
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 生物化学与细胞生物学
• 页码范围: 405-414
• 页数: 10页
• 分类号: Q813|Q959.848
• 字数: 6363字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0254-5853.2008.04.008

摘要

用转基因和RNA干扰(RNAi)法建立5组不同成纤维细胞生长因子-2(fibroblast growth factor-2,FGF2)表达量的猕猴耳部皮肤成纤维细胞(MESF)系:过表达FGF2组(f1),过表达的阴性对照组(f2),FGF2 RNA干扰组(f3),RNA干扰的阴性对照组(f4)和未作任何处理的对照组(f5).5组MESF的FGF2表达量相对值为f1:f2:f3:f4:f5=4:2:1:2:2;c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlinl在f1中表达量上升,在f3中表达量下降;BMP4,TGF-β2在f1中表达量下降,在f3中表达量上升;表明内源FGF2能够作用于MESF的TGF-β信号通路,引起相关基因表达量的变化.用这砦细胞作为饲养层长期培养(10代)猕猴胚胎干细胞(RhESC),结果在f1上培养的RhESC增殖速度都比对照组快,并且c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlinl,Oct-4,Nanog,Sox2表达量均上升,BMP4表达下调;在f3上培养的RhESC增殖较慢,BMP4表达上调,c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlinl,Oct-4,Nanog,Sox2表达下调.5组MESF上培养的RhESC形成的EB均表达各胚层早期标记基因(marker),说明RhESC的多能性没有受到影响,但表达量有差异,f1上RhESC形成的EB所有marker都低表达.结果表明饲养层的FGF2含量不仅影响自身相关基凶的表达,还对RhESC的自我更新有一定的作用.