小鼠骨髓源半成熟树突状细胞的培养与初步鉴定

• 作者: 付必莽 何晓顺 余思 胡安斌 马毅 黄洁夫
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 半成熟树突状细胞 培养 鉴定
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 430-435
• 页数: 6页
• 分类号: R392.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-503X.2008.04.014

摘要

目的 探索培养与鉴定小鼠骨髓来源半成熟树突状细胞 (smDC) 的可行方法.方法 分离、纯化6周龄C57BL/6小鼠骨髓单核细胞,以含10%胎牛血清、2 ng/ml重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和20ng/ml重组小鼠白细胞介素(IL)-4的RPMI-1640培养基培养9 d;再以肿瘤坏死因子-a (TNF-a)(40ng/ml)刺激24 h获得smDC,同时以脂多糖(1 ug/ml)刺激和不加刺激培养24 h获得成熟DC(mDC)和未成熟DC(iDC).扫描电子显微镜、流式细胞术、ELISA检测iDC、mDC和mDC的形态、细胞表面标志及细胞因子的表达.建立体外淋巴细胞反应模型,采用细胞计数试剂盒检测smDC对异基因淋巴细胞的活化作用.结果 smDC的体积介于iDC和mDC之间、多呈类圆形或圆形,胞体直径约为15um,树突长度多在5-10 μm.smDC、iDC与mDC均高表达CD11c,smDC表达CD40、CD80、CD86及MHC.II介于iDC和mDC之间.smDC分泌IL-1β、IL-6和IL-12显著低于mDC(P＜0.01)、分泌IL-12显著低于iDC(P＜0.05),分泌IL-Iβ、IL-6与iDC比较差异无显著性(P＞0.05);smDC、iDC与mDC分泌1L-10差异无显著性(P＞0.05).smDC对异基因淋巴细胞激活作用显著低于mDC和阳性对照(P＜0.01),而与阴性对照和iDC差异无显著性(P＞0.05).结论 smDC可能是一个功能和形态上相对独立的DC亚群,体外利用GM-CSF、IL-4和TNF-a诱导骨髓单核细胞是获得smDC的有效方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄洁夫	中山大学附属第一医院器官移植中心	105	730	13.0	20.0
2	何晓顺	中山大学附属第一医院器官移植中心	181	840	13.0	19.0
3	余思	中山大学附属第一医院器官移植中心	10	50	5.0	6.0
4	胡安斌	中山大学附属第一医院器官移植中心	35	103	5.0	8.0
5	马毅	中山大学附属第一医院器官移植中心	90	311	10.0	12.0
6	付必莽	中山大学附属第一医院器官移植中心	4	25	2.0	4.0