猪血凝性脑脊髓炎病毒HE基因的克隆及真核表达

• 作者: 宋德光 尹继刚 王龙涛 贺文琦 陆慧君 高丰
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 血凝性脑脊髓炎病毒 HE蛋白 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医
• 页码范围: 853-857
• 页数: 5页
• 分类号: Q78|S852.65
• 字数: 3540字
• 语种: 中文

摘要

应用特异性引物,从猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)中扩增出HE蛋白基因,PCR产物纯化后克隆入pGEM-T载体,得到重组质粒pTHE.用EcoRI和Not I双酶切pTHE,回收目的基因HE片段并将其定向克隆到pPICZáA中,构建重组质粒pHCZáA HE.用BstXI酶切pPICZáA HE使其线性化,并电击转化至感受态毕赤酵母细胞GS115.PCR法鉴定阳性重组子,用1%甲醇诱导表达后,进行SDS-PAGE及Western blot分析.结果在酵母菌培养基上清中检测到相对分子量为43 kD的重组蛋白,且该重组蛋白可与HEV多克隆抗体发生特异性血清学反应,表明HEV的HE蛋白片段在Pichia Pastoris中获得成功表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贺文琦	吉林大学畜牧兽医学院	70	253	8.0	12.0
2	陆慧君	吉林大学畜牧兽医学院	39	161	8.0	10.0
3	宋德光	吉林大学畜牧兽医学院	41	118	6.0	9.0
4	高丰	吉林大学畜牧兽医学院	88	276	9.0	12.0
8	王龙涛	吉林大学畜牧兽医学院	49	93	6.0	7.0
10	尹继刚	吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病教育部重点实验室	51	322	9.0	16.0