猪血凝性脑脊髓炎病毒PK细胞膜受体的鉴定

• 作者: 刘立国 宋德光 常灵竹 李志萍 贺文琦 陆慧君 陈克研 高丰
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 血凝性脑脊髓炎病毒(HEV) 病毒铺覆蛋白结合试验(VOPBA) 受体
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 20-23
• 页数: 4页
• 分类号: S188
• 字数: 2752字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2008.01.004

摘要

在毕赤酵母(Pichia pastoris)中表达猪血凝性脑脊髓炎病毒(Hemagglutinating encephalomyelitis virus,HEV)67N株S蛋白片段,纯化后免疫家兔,获得兔抗HEV-S蛋白特异性抗体;提取PK细胞膜蛋白,SDS-PAGE电泳后,转印NC膜,以纯化的S1蛋白代替病毒,利用改进的病毒铺覆蛋白结合试验(COPBA)对PK细胞膜受体进行鉴定.结果扩增获得1 797 bp的S1目的基因片段,用S1特异性引物和AOX1通用引物PCR鉴定结果表明,实验成功地构建了重组酵母表达质粒,重组酵母菌经1%甲醇诱导,在培养基上清中检测到73 kD目的蛋白.Western blot分析发现,该重组蛋白可与HEV多克隆抗体发生特异性血清反应;提取的PK细胞膜蛋白转膜后与纯化的S1目的蛋白结合,DAB显色发现在90 kD处有清晰的蛋白带.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贺文琦	吉林大学畜牧兽医学院	70	253	8.0	12.0
2	陆慧君	吉林大学畜牧兽医学院	39	161	8.0	10.0
3	宋德光	吉林大学畜牧兽医学院	41	118	6.0	9.0
4	高丰	吉林大学畜牧兽医学院	88	276	9.0	12.0
5	刘立国	吉林大学畜牧兽医学院	13	72	6.0	8.0
6	常灵竹	吉林大学畜牧兽医学院	6	30	3.0	5.0
7	李志萍	吉林大学畜牧兽医学院	10	48	4.0	6.0
8	陈克研	吉林大学畜牧兽医学院	16	47	4.0	6.0