牦牛乳酸脱氢酶B基因突变体的克隆鉴定研究

• 作者: 吴常信 周静 朴影 李宁 洪键 贺庆华 赵兴波 郑玉才 金素钰
• 来源期刊: 中国科学C辑
• 关键词: 牦牛(Bos grunniens) 乳酸脱氢酶 遗传变异体 基因克隆 分子建模
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 页码范围: 131-135
• 页数: 5页
• 语种: 中文

摘要

通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分析证实牦牛(Bos grunniens)乳酸脱氢酶存在两种类型,根据LDH同工酶谱的特点推测牦牛LDH多态是由B基因变异所致,并由此将凝胶电泳中迁移率快的LDH同工酶谱带称为LDH-Bf类型,迁移率慢的称为LDH-Bs类型.为阐明牦牛LDH变异体的分子机制,实验从牦牛心脏组织中提取总RNA,采用RT-PCR方法分别克隆了LDH-Bf和LDH-Bs两种类型的B基因cDNA全长序列;序列比对分析发现LDH-Bf和LDH-Bs基因存在4个碱基差异;依据cDNA序列推导的氨基酸序列的比对分析,发现两者之间存在两个氨基酸差异;利用Deepview分子建模软件进行的牦牛H亚基及LDH1突变体的高级结构预测,发现突变的两个氨基酸都能产生新的H键,影响整个蛋白分子的H键网络,并进一步导致蛋白分子空间结构的变化.