体外培养小脑浦肯野神经元转染及条件的优化

• 作者: 张军 石红军 邵志华
• 来源期刊: 同济大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 浦肯野神经元 转染 优化
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 4-8
• 页数: 5页
• 分类号: Q33
• 字数: 2887字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨用化学转染试剂体外转染小脑浦肯野神经元的最佳转染条件.方法 体外分离培养E18 d的昆明小白鼠的小脑浦肯野神经元,用lipofectamineTM2000、磷酸钙沉淀试剂、Effectene转染试剂包被质粒分别转染体外培养7 d的浦肯野神经元.另外,用lipofectamineTM2000包被质粒,分别转染7、14、21 d以及28 d浦肯野神经元.每组分为5个样本.48 h后观察绿色荧光蛋白的表达情况,并用台盼兰检测细胞的存活率.结果 (1)3种转染试剂的最高转染率分别为lipofectamineTM2000(19.63±5.76)%、磷酸钙沉淀法(1.84±1.85)%、Effectene(1.48±1.38)%.lipofectamineTM2000与其他两种方法的转染率均有显著差异.(2)2 μl的lipofectamineTM2000的转染效率为(15.11±4.01)%,细胞存活率与对照组没有明显差异,为(92.98±2.10)%.(3)培养早期(7 d、14 d)的浦肯野神经元损伤小,与对照组没有明显差异.结论 该实验首次证实了lipofectamineTM2000能有效地转染体外培养的小脑浦肯野神经元.不同的发育阶段对转染效率也有较大的影响,lipofectamineTM2000比较适合早期的浦肯野神经元转染.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张军	同济大学基础医学院生物教研室	100	1056	15.0	29.0
2	石红军	同济大学基础医学院生物教研室	29	200	8.0	12.0
3	邵志华	同济大学基础医学院生物教研室	16	178	7.0	13.0