腺病毒介导MCP-1-siRNA对人单核细胞体外迁移能力的影响

• 作者: 卢忠燕 甘立霞 缪洪明 谭力 陈姗
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 单核细胞趋化蛋白1 糖尿病肾病 腺病毒介导 体外迁移能力
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 493-497
• 页数: 5页
• 分类号: Q782
• 字数: 4286字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2008.06.006

摘要

目的 构建针对单核细胞趋化蛋白1(monoeyte chemoattractant protein 1,MCP-1)基因的小分子干扰RNA(siRNA)重组腺病毒,探讨干扰MCP-1表达对人单核细胞白血病株THP-1迁移能力的影响.方法 设计并合成针对人MCP-1的siRNA的靶DNA序列,克隆于穿梭载体pAdTrack-CMV中,与带有腺病毒骨架质粒pAdeasy-1的BJ5183细菌中进行同源重组,获得重组腺病毒载体pAdeasy-si-MCP-1,转染人胚肾细胞株293细胞,包装并扩增病毒颗粒.体外感染能表达MCP-1的293细胞,RT-PCR检测siRNA对MCP-1转录水平影响.Millicell细胞迁移实验检测对人单核细胞白血病株THP-1体外迁移能力的影响.结果 高糖诱导下,人293细胞MCP-1的表达增强;而Ad-si-MCP-1感染后,能够显著抑制高糖刺激的MCP-1 mR-NA水平的升高;Ad-si-MCP-1感染293细胞后的培养上清对THP-1的趋化作用较高糖刺激组及其siRNA阴性对照组显著降低.结论 成功构建了抑制MCP-1表达的siRNA腺病毒载体,其抑制MCP-1表达可明显抑制高糖诱导的THP-1的趋化作用,提示MCP-1表达的干预可能为糖尿病肾病等MCP-1相关疾病提供新的预防和治疗手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	甘立霞	第三军医大学生物化学与分子生物学教研室	26	127	7.0	10.0
2	缪洪明	第三军医大学生物化学与分子生物学教研室	13	40	4.0	5.0
3	卢忠燕	第三军医大学生物化学与分子生物学教研室	12	74	4.0	8.0
4	陈姗	第三军医大学生物化学与分子生物学教研室	14	74	4.0	8.0