口蹄疫病毒VP1基因siRNA重组腺病毒的构建及其介导的RNAi抑制口蹄疫病毒复制的研究

• 作者: 吕英然 琚春梅 贾俊涛 赵明秋 陈立军 陈金顶
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 口蹄疫病毒 RNA干扰 重组腺病毒
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 11-13
• 页数: 3页
• 分类号: S852.65+9.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-6005.2010.01.004

摘要

本研究选择O型FMDV VP1基因上保守序列作为可能的干扰位点,合成了siRNA,将siRNA克隆到pSIREN-Shuttle中,获得siRNA重组表达载体pShuttle-VP1.用限制性内切酶PI-Sce I和I-Ceu I双酶切siRNA重组表达载体和腺病毒质粒载体pAdeno-X,利用体外连接法获得了重组质粒.经过PCR扩增、酶切鉴定及序列测定,证明成功构建了重组腺病毒质粒pAdeno-VP1.利用脂质体转染法,将Pac I线性化的重组腺病毒质粒pAdeno-VP1转染HEK293细胞,包装成重组腺病毒rAdeno-VP1.经过PCR鉴定正确后大量增殖,增殖的重组腺病毒经过浓缩、纯化得到了高滴度的病毒.用终点稀释法测定病毒滴度为2.5×109 PFU/mL.将rAdeno-VP1感染IBRS-2细胞后,12 h后再加入100TCID50的FMDV O/HKN/2003.结果显示,重组腺病毒能够抑制FMDV的复制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈金顶	华南农业大学兽医学院	58	491	10.0	21.0
2	赵明秋	华南农业大学兽医学院	39	256	7.0	15.0
3	琚春梅	华南农业大学兽医学院	26	80	6.0	7.0
4	陈立军	华南农业大学兽医学院	6	17	2.0	4.0
5	贾俊涛	华南农业大学兽医学院	1	1	1.0	1.0
6	吕英然	华南农业大学兽医学院	1	1	1.0	1.0