百合叶片总RNA提取方法比较及优化

• 作者: 义鸣放 尹慧 李晓艳 陈秋明 陈莉
• 来源期刊: 中国农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 百合 叶片 RNA提取 CTAB改进法 多糖 RT-PCR
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 农业科学
• 页码范围: 41-45
• 页数: 5页
• 分类号: S682.2
• 字数: 5032字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-4333.2008.04.008

摘要

为筛选出适合百合叶片RNA提取方法,以铁炮百合‘白天堂'组培苗叶片为材料,比较了改进的CTAB、SDS及传统的Trizol、CTAB、SDS方法提取RNA的效果.结果表明:不论传统及改进的SDS法和Trizol法均不能有效去除百合叶片组织中的多糖、蛋白等杂质,传统CTAB法提取RNA存在DNA污染.针对百合叶片组织富舍多糖多酚的特点,改进了CTAB法,采用醋酸钠及无水乙醇去除多糖,酚/氯仿反复抽提去除蛋白,DNase Ⅰ去除DNA,LiCl有效沉淀RNA.采用此方法提取的RNA条带清晰,经紫外光谱分析D260/D280比值为2.0,D260/D230为2.1,电泳28S、18S条带清晰,比值约为1.5.RT-PCR结果表明,改进的CTAB法提取的总RNA可直接用于分子克隆和基因表达分析等分子生物学实验.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈莉	中国农业大学农学与生物技术学院	18	163	8.0	12.0
2	义鸣放	中国农业大学农学与生物技术学院	59	803	16.0	25.0
3	陈秋明	中国农业大学农学与生物技术学院	3	78	2.0	3.0
4	尹慧	中国农业大学农学与生物技术学院	4	93	3.0	4.0
5	李晓艳	中国农业大学农学与生物技术学院	24	130	6.0	11.0