樟树不同组织总RNA提取方法比较及RT-PCR检测

• 作者: 伍艳芳 宋晓琛 徐海宁 江香梅
• 来源期刊: 南方林业科学
• 关键词: 樟树 不同组织 总RNA 提取方法 RT-PCR检测
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: S794.4|Q78
• 语种: 中文

摘要

采用Invitrogen Total RNA Purification Kit直接提取法，Trizol试剂盒法和本实验室改良的CTAB法，分别提取樟树不同组织（根、茎、叶和花）的总RNA，并对提取效果进行了检测和比较分析。结果表明：（1）采用本实验室改良的CTAB法提取的RNA完整性好，无杂质污染且得率高，稳定性好，可满足半定量RT-PCR等试验需要；而Invitrogen Total RNA Purification Kit直接提取法和Trizol试剂盒法提取的樟树不同组织总RNA，结果均不理想，存在RNA 28S rRNA谱带模糊不清、有DNA污染、降解严重和得率低等问题，这两种方法均不适用于樟树不同组织RNA的提取。（2）樟树不同组织总RNA提取的得率不同，其中叶片的总RNA得率最高，达到782.34 mg/kg；茎的得率最低，为514.33 mg/kg。（3）以Actin作为内参基因，对樟树根、茎、叶和花中的Fad2基因片段进行半定量RT-PCR检测，结果表明，Fad2基因片段在樟树叶片中的表达量相对较高，而在花中的表达量较低。