重组可溶性TRAIL的表达及其诱导A549和H460wt细胞凋亡

• 作者: 刘磊 方艳秋 许淑芬 谭岩
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 细胞凋亡 癌,非小细胞肺 顺铂
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 270-273
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|R734.2
• 字数: 3150字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-587X.2008.02.025

摘要

目的:获得人重组可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(rsTRAIL)蛋白,并探讨其应用于非小细胞肺癌(NSCLC)治疗的前景.方法:RT-PCR从外周血单核细胞(PBMCs)中获取目的基因片段,构建重组质粒PQEh30-TRAIL并转化人大肠杆菌(E.coli)M15,IPTG诱导目的蛋白表达并经镍固定金属亲和层析纯化,MTT法检测细胞增殖情况,荧光显微镜观察H460wt细胞的形态学改变,流式细胞仪检测其凋亡率.结果:获得与GenBank中报道一致的TRAIL基因片段.SDS-PAGE电泳和免疫印迹分析显示,获得具有TRAIL免疫原性、相对分子质量约为21 000目的蛋白.Ni2+-NTA agarose纯化得到单一条带蛋白.rsTRAIL处理H460wt细胞24 h后,细胞凋亡率为43.2%,顺铂可以增强rsTRAIL对A549细胞的杀伤作用.结论:获得了与天然TRAIL蛋白具有相同生物学活性的目的蛋白,该目的蛋白具有诱导NSCLC细胞凋亡的作用,联合顺铂能够增强rsTRAIL对NSCLC的杀伤作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘磊	吉林大学第一医院中心实验室	211	1231	18.0	25.0
2	谭岩	吉林大学第一医院中心实验室	135	608	9.0	17.0
3	方艳秋	吉林大学第一医院中心实验室	76	250	7.0	11.0
4	许淑芬	吉林大学第一医院中心实验室	37	200	6.0	13.0