MCP-1/CCR2通路参与骨髓基质细胞向脊髓全横断损伤区迁移的实验研究

• 作者: 丁鹏 余化霖 冯忠堂 李园园 杨智勇 林荣安 王进昆 薛黎萍 路钢
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓基质细胞 趋化因子 迁移 脊髓损伤
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 121-125,180
• 页数: 6页
• 分类号: R329.28
• 字数: 4721字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2008.02.001

摘要

[目的]探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及其受体CCR2在骨髓基质细胞(MSC)体内、外迁移中的作用.[方法]体外培养、纯化大鼠MSC,取第五代MSC行免疫荧光鉴定;免疫组化、RT-PCR检测纯化MSC表达CCR2情况;Boyden小室法检测趋化因子MCP-1(5～500ng/mL)对MSC的趋化迁移作用及其特异性.42只成年大鼠用于体内研究(脊髓全横断组24只,假手术组9只,正常大鼠9只),分别于术后1,3,7,14 d取材,行免疫组化检测MCP-1表达,或行MCP-1的Real-time PCR定量分析.或颈内静脉注射荧光标记的MSC,观察MSC向脊髓迁移情况.[结果]第5代MSC都表达间充质干细胞标记物Vimentin、Laminin及Fibroneetin;细胞免疫荧光、RT-PCR证实MSC表达趋化因子受体CCR2;MCP-1(5～500 ng/mL)体外可趋化MSC迁移(P＜0.05),抗MCP-1抗体可对抗其趋化迁移作用(P＜0.05).脊髓全横断组、对照组脊髓均表达MCP-1,但细胞分布、染色存在差异,影响MCP-1定量.脊髓损伤后趋化因子MCP-1 RNA在1d、3d及7d较对正常对照组差异有统计学意义(P＜0.05),术后14 d时MCP-1 RNA与正常对照相比差异无统计学意义(P＞0.05),伴随其变化,脊髓损伤区迁移MSC较对照差异有统计学意义(P＜0.05).[结论]MCP-1体内、外可趋化MSC迁移,MCP-1/CCR2通路参与MSC向脊髓全横断损伤区的迁移.