冬生疫霉(Phytophthora hibernalis)的快速分子检测

• 作者: 任众 刘翔 吴新华 张正光 张海峰 王源超 郑小波
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 冬生疫霉 分子检测 PCR
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 病原学
• 页码范围: 231-237
• 页数: 7页
• 分类号: S41-30|S432.44
• 字数: 3423字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0412-0914.2008.03.002

摘要

由冬生疫霉(Phytophthora hibernalis)引起的疫病是一类植物检疫性病害.为建立该病原菌的快速检测技术,本文比较分析了冬生疫霉和其它疫霉的ITS序列,在此基础上设计了一对检测冬生疫霉的特异性引物751F/752R,该对引物从冬生疫霉中扩增得到一条616 bp的条带,而其它19种疫霉和其它真菌菌株均无扩增条带,表明该对引物对冬生疫霉具有特异性.在25μLPCR反应体系中,引物751F/752R检测灵敏度为10fg基因组DNA;而以卵菌ITS区通用引物ITSl/ITS4和751F/752R进行套式PCR扩增,能够检测到10 ag的基因组DNA,使检测灵敏度提高了1000倍.该检测体系对灭菌水中游动孢子的检测灵敏度可达0.5个游动孢子.结合快速碱裂解法提取发病组织的DNA,采用该PCR检测技术,在1个工作日内即可从人工接种发病的植物组织中特异性的检测到该病原菌.表明本研究建立的检测方法可用于冬生疫霉的快速分子检测.