烟草疫霉菌LAMP检测方法的建立及验证

• 作者: 吴娜 康业斌 李淑君
• 来源期刊: 中国烟草科学
• 关键词: 烟草疫霉菌 烟草黑胫病 环介导等温扩增(LAMP) 羟基萘酚蓝(HNB)
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 74-80
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13496/j.issn.1007-5119.2020.01.012

摘要

为了建立烟草疫霉菌(Phytophthora parasitica)可视化快速检测方法,试验以羟基萘酚蓝(HNB)为指示剂,以烟草疫霉菌特异的核糖体转录间隔区(Internal transcribed spacer,ITS)为目的DNA片段,应用LAMP设计软件设计4条引物,通过优化LAMP反应体系和反应条件,建立一种准确快速的LAMP检测方法,并对该检测方法的特异性、灵敏度及实际应用效果进行验证.结果表明,本试验建立的烟草疫霉菌LAMP反应体系具有较好特异性且灵敏度较高.特异性检测只有烟草疫霉菌株LAMP产物为阳性(蓝色),且电泳结果能够产生梯形条带;灵敏度验证在DNA水平上可达到100 fg,是普通PCR检测方法的1000倍.对田间疑似黑胫病病株及其根际土样提取的DNA进行LAMP检测,各有3份样本为阳性,且病株检测结果与组织分离法对烟草疫霉的检测结果相一致;接种2 d后,病害症状还不明显的烟株中即可检测到烟草疫霉菌.本研究建立的烟草疫霉LAMP检测体系,可快速、简捷地检测到病株及其携带土壤中的烟草疫霉菌.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	康业斌	河南科技大学林学院	61	370	10.0	16.0
2	李淑君	河南省农业科学院烟草研究所	33	297	10.0	16.0
3	吴娜	河南科技大学林学院	2	2	1.0	1.0