虾肝肠胞虫LAMP检测技术的建立与应用

• 作者: 刘国庆 段丽萍 石磊 谢会 陈洵 陈珍容 陈进会
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 虾肝肠胞虫 环介导等温扩增(LAMP) 18S qPCR
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 26-29,33,封2
• 页数: 6页
• 分类号: S852.723
• 语种: 中文

摘要

本试验根据虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)18S的保守序列设计4套环介导等温扩增(LAMP)引物,从中筛选出一套引物对LAMP反应体系(BstDNA聚合酶浓度、内外引物浓度比、dNTP浓度、Mg2+浓度)和反应条件(温度)进行优化.并对优化后的LAMP反应体系和条件进行特异性、灵敏度及精密度验证.特异性试验表明,该方法能特异性检测虾肝肠胞虫,而与其他病害的核酸没有交叉反应;灵敏度试验表明,可检测浓度为10 fg/μL的质粒DNA,制作的标准曲线可对虾肝肠胞虫进行定量分析.重复性试验结果表明,该方法Ct值的变异系数为2.88％～ 3.02％,具有良好的稳定性.而对于人工侵染的虾肝肠胞虫样品,LAMP方法可检测低至0.44 pg/μL.应用建立的LAMP方法对3个不同地区的120份凡纳滨对虾样品进行检测,检测结果表明,EHP阳性样品数为43,与qPCR检测结果符合率达97％.本试验所建立的LAMP方法具有特异性好、灵敏度高、重复性好的特点,并能在30 min内完成样品的检测,是快速、定量检测虾肝肠胞虫的有效手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈洵	暨南大学食品安全与营养研究院	3	5	1.0	2.0
2	石磊	暨南大学食品安全与营养研究院	7	5	2.0	2.0
3	陈进会		1	0	0.0	0.0
4	陈珍容		1	0	0.0	0.0
5	刘国庆		1	0	0.0	0.0
6	段丽萍	暨南大学食品安全与营养研究院	1	0	0.0	0.0
7	谢会	暨南大学食品安全与营养研究院	1	0	0.0	0.0