家蚕核型多角体病毒LAMP可视化检测技术的建立

• 作者: 卓秋红 屈达才 李俊 梁湘 陈慧珠 龙羽燕
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 家蚕核型多角体病毒(BmNPV) 家蚕血液型脓病 LAMP 早期诊断 可视化
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·水产·蚕桑
• 页码范围: 163-168
• 页数: 6页
• 分类号: S884.51
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2017.01.163

摘要

[目的]建立针对家蚕核型多角体病毒(BmNPV)的环介导等温扩增(LAMP)可视化检测技术,为生产现场进行家蚕血液型脓病早期诊断提供技术支持.[方法]以BmNPV多角体蛋白基因po如为扩增靶标,分别设计5组内/外引物和5条环引物,根据扩增效率筛选最佳引物组合;优化LAMP反应条件,并进行LAMP检测的特异性、敏感性及临床样本检测试验;使用羟基萘酚蓝(HNB)染色对结果进行比色观察,对简化样品处理的条件进行摸索.[结果]使用环引物后LAMP对BmNPV基因组DNA的最低检测浓度为7fg/μL,检测灵敏度得到有效提高,且反应时间缩短.建立的LAMP检测方法对靶标DNA扩增具有特异性,对样本的检出率高于常规PCR,其最低检测限是常规PCR的100倍.在反应前加入HNB,结果易判断且能减少交叉污染.感染家蚕血淋巴进行100℃煮沸处理后即可直接用于LAMP反应,既简化了操作步骤,又降低了检测成本.[结论]针对BmNPV建立的LAMP可视化检测技术具有灵敏、快捷、可靠的特点,适合用于生产现场的BmNPV感染早期诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李俊	广西大学农学院	37	102	6.0	8.0
2	屈达才	广西大学农学院	36	168	6.0	10.0
3	梁湘	广西大学农学院	11	27	4.0	4.0
5	龙羽燕	广西大学农学院	4	5	1.0	2.0
6	陈慧珠	广西大学农学院	4	11	2.0	3.0
9	卓秋红	广西大学农学院	1	4	1.0	1.0