以Zeocin抗性基因为选择标记的Candida glycerinogenes遗传转化

• 作者: 方慧英 沈微 王正祥 诸葛健 陈献忠 饶志明
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 工学
• 关键词: 产甘油假丝酵母 遗传转化系统 电击转化 整合质粒
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 176-180
• 页数: 5页
• 分类号: TQ920
• 字数: 3771字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2008.02.008

摘要

为从分子水平上阐释产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)高产甘油机理,建立一种方便可行的遗传转化系统是十分必要的.与G418和潮霉素等抗生素相比,Zeocin抗生素对C.glycerinogenes具有较低的致死浓度.以pGAPZb作为构建整合载体的骨架,以Zeocin抗性基因作为选择标记,以URA3基因作为整合位点,构建了C.glycerinogenes整合载体pGA-CU.整合载体经过限制酶线性化后用作转化载体,基于电击转化的方法成功获得了抗Zeocin的转化子并经过PCR分析进一步确证.通过优化电击转化的参数,获得了较为稳定的转化效率,基于这一技术的转化效率每微克DNA可获得120个转化子.为进一步研究该菌株的遗传背景和代谢机理奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	方慧英	江南大学工业生物技术教育重点实验室	95	670	12.0	22.0
2	诸葛健	江南大学工业生物技术教育重点实验室	150	1920	23.0	36.0
3	沈微	江南大学工业生物技术教育重点实验室	98	817	14.0	24.0
4	饶志明	江南大学工业生物技术教育重点实验室	107	599	12.0	20.0
5	王正祥	江南大学工业生物技术教育重点实验室	120	1443	20.0	31.0
6	陈献忠	江南大学工业生物技术教育重点实验室	33	205	8.0	13.0