柱前手性荧光衍生反相高效液相色谱法分离甲状腺素对映体

• 作者: 张美娜 贾绍栋 金东日
• 来源期刊: 色谱
• 学科: 化学
• 关键词: 高效液相色谱 荧光检测 柱前衍生化 荧光衍生化试剂 手性拆分 甲状腺素对映体
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 559-562
• 页数: 4页
• 分类号: O658
• 字数: 2860字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8713.2008.05.007

摘要

以R(-)-4-N,N-二甲基磺酰胺-7-(3-异氰酸吡咯烷)-2,1,3-苯并氧杂咪唑(R(-)-DBD-PyNCS)为手性荧光衍生化试剂,成功地拆分了甲状腺素对映体D,L-四碘甲状腺原氨酸(T4)和L-三碘甲状腺原氨酸(T3).在反应温度为40℃、反应时间为20 min时,R(-)-DBD-PyNCS在碱性介质中可与甲状腺素对映体生成稳定的非对映体衍生物.该衍生物在以乙腈-水-醋酸(体积比为60:40:1)为流动相,流速为1.0 mL/min,色谱柱为Intersil@-ODS-3 C18柱(150 inm×4.6 ml,5μm)的色谱条件下得到了充分的分离.采用荧光检测器在激发波长460 nm、发射波长550 nm下检测.D,L-T4和L-T3分别在0.016～0.30μg/μL和0.006 7～0.22μg/μL范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系(r>0.999).D,L-T4和L-T3)的最低检出限分别为0.02 μg/mL和0.85μg/mL(S/N=3).在D-T4、L-T4、L-T3质量浓度分别为0.10μg/μL下测得峰面积的相对标准偏差分别为3.40%,1.63%,3.30%(n=7).该方法成功地应用于甲状腺片中T4和T3的含量测定.