α1,3-半乳糖基转移酶基因沉默对NK细胞介导的异种细胞毒作用的影响

• 作者: 刘斌林 曹荣华 朱珉 正斌 王璐 祁洪刚 陈刚 陈实 陈知水 黄亚冰
• 来源期刊: 中华器官移植杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 杀伤细胞,天然 内皮细胞 半乳糖转移酶类
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 460-463
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3287字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-1785.2008.08.003

摘要

目的 探讨α1,3-半乳糖基转移酶(α1,3-GT)基因沉默对人自然杀伤(NK)细胞介导的异种细胞毒作用的影响.方法 将培养的永生化猪血管内皮细胞系细胞株PED分为3组.转染组:PED转染了特异性α1,3-GT 核糖核酸干扰分子(SiRNA-1);错配组:PED转染了错配的SiRNA;空转染组:PED未转染SiRNA.观察各组PED与人NK细胞系细胞株NK 92在静止和流动状态下的粘附作用、不同效靶比下的NK92细胞毒作用以及PED和NK 92混和培养上清液中γ干扰素(IFN-γ)的水平.结果 PED转染后48 h,转染组、错配组和空转染组在静止状态下粘附NK92的数量(个)分别为262±26、275±24和252±23;流动状态下分别为132±12、125±15和110±20,无论是静止还是流动状态下,各组PED对NK92的粘附能力的比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).无论PED是否被活化,在相同效靶比下NK92对各组PED的杀伤率的比较,差异均无统计学意义(P＞0.05),但杀伤率与效靶比呈正相关.NK92与PED共孵育早期即有反应性IFN-γ分泌,其分泌水平[(366.9±28.7)ng/L]较其自发分泌水平[(60.1±6.4)ng/L]增加了5倍,在共孵育后12 h分泌值最高,但各组间不同时段IFN-γ分泌值的比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 利用RNA干扰技术下调PED上的α1,3-半乳糖残基(α-Gal)的表达,未引起NK92和PED相互作用的明显改变.α-Gal可能并非是NK细胞作用的靶位点,其表达量的高低对NK细胞的活化、粘附及杀伤能力未产生负性影响.