PRRSV-PCV2重组病毒的构建及PRRSV转录调控机制研究

• 作者: 孙志 朱兴全 袁世山 郑海红
• 来源期刊: 微生物与感染
• 学科: 医学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸道综合征病毒 猪圆环病毒Ⅱ型 载体表达 转录调控序列
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 147-153
• 页数: 7页
• 分类号: R3
• 字数: 4376字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-6184.2008.03.006

摘要

目的 本研究旨在探讨猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染性cDNA克隆作为猪圆环病毒(PCV2)的主要免疫原开放阅读框架2(ORF2)表达载体的可行性,以及利用重组病毒对PRRSV复制转录过程进行解剖.方法 以北美株PRRSV感染性克隆pAPRRS为平台进行反向遗传操作,分别在pAPRRS的ORF1和ORF2间,ORF5和ORF6间,ORF6和ORF7间插入PCV2 ORF2,且对拯救病毒vPCV进行了病毒学及分子生物学鉴定.结果 vPCV的sgmRNA2.1利用了PRRSV mRNA2的转录调控序列(TRS),形成由PRRSV GP2和PCV2衣壳蛋白组成的sgmRNA2.1.外源基因的插入同时也导致重组病毒启用新的TRS 而产生3条新亚基因组,其中sgmRNA2.2和sgmRNA2.3采用PCV2上的序列来取代PRRSV RNA2本身的TRS;另一条sgmRNA2.4则为非经典型亚基因组,其TRS在PRRSV相应的AUG下游.结论 2株PRRSV-PCV2重组病毒可以稳定传代,为进一步研发PRRSV遗传标疫苗奠定了基础;插入片段上一些类似TRS序列的引入及插入片段(718bp)过长导致PRRSV ORF2 TRS 本身和其两翼序列的RNA结构变化是引起重组病毒遗传不稳定性的最主要原因;PRRSV可以利用TRS样外源序列作为转录启动子,这为进一步解剖PRRSV复制转录过程奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱兴全	华南农业大学兽医学院	127	1286	20.0	27.0