靶向HP-PRRSV ORF7基因siRNA体外抑制HP-PRRSV HN1株复制研究

• 作者: 曹素芳
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: HP-PRRSV RNA干扰 siRNA
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 25-28,中插1
• 页数: 5页
• 分类号: S852.61
• 语种: 中文

摘要

为了体外评价靶向高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV) ORF7的siRNA对HP-PRRSV复制的抑制效果.将3μg siRNA重组质粒载体pSilencer-N2转染于Marc-145细胞中,24 h后再分别接种0.01 MOI PRRSV,感染病毒48 h后,观察其抑制HP-PRRSV HN1株复制效果;待细胞感染病毒72 h后,应用间接免疫荧光试验(IFA)、实时荧光定量PCR及Western Blot检测siRNA重组质粒对HP-PRRSV在细胞中复制的抑制作用.体外结果显示,在最佳接毒量0.01 MOI和最佳接毒时间24 h时,siRNA重组表达质粒在HP-PRRSV感染后48 h能明显抑制病毒的复制,与对照组相比,病毒滴度降低了2个多数量级,抑制达到100～1 000倍.有效干扰持续时间,检测结果表明,与对照组相比,siRNA重组质粒显著抑制HP-PRRSV的增殖,推迟CPE的发生时间,其抑制作用可以持续到感染后的4天.为高致病性猪繁殖与呼吸综合征防控提供有力的物质支持.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹素芳	河南牧业经济学院动物医学院	10	8	2.0	2.0