血细胞分离机大量采集实验猕猴外周血单核细胞方法探讨

• 作者: 代解杰 孙晓梅 曹春渝 陆彩霞 陈洁 陈瑜 高家红 黄璋琼
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 实验猕猴 外周血单核细胞 造血干细胞 采集
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 424-427
• 页数: 4页
• 分类号: R-33
• 字数: 3877字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2008.06.006

摘要

目的 使用COBE Spectra血液成分分离机大量采集实验猕猴外周血单核细胞(PBMCs),继而可从中分离得到外周血造血干细胞(PBSC),为进一步利用猕猴开展免疫学研究、基因治疗提供足够的目的 细胞,探讨采集的关键技术,建立安全、有效的采集方法.方法 体重为4-5奴的实验猕猴5只,采集前一个月内分3次进行自体或异体血液于4℃储备共120 mL,用于采集时填充管路.5只猴采集前接受rhGM-CSF 20μg/ks皮下注射动员4～5 d,麻醉动物后行股动脉穿刺,选择自动外周血干细胞收集程序(Auto-PBSC)进行采集.采集结束后管路中血液以10 mL/min回输给动物3～5 min.结果 生长因子连续注射第4天外周血白细胞数增至最高,收获细胞数量随循环血量和采集次数增加而增多.经动员的所有猴能够采集到需要的PBMC,最多达9.9×108,采集次数1～3次,循环血量达750～1420 mL,实验结束后1只猕猴因心脏衰竭死亡.结论 人用血细胞分离机可用于4～5 kg实验猕猴PBMC的大量采集.由于动物不同于人体,为保证采集成功需要选用适合于猕猴的程序,采集前做好储血和生长因子动员准备,稳定的麻醉保定,提高抗凝剂比例,积极处理并发症是关键.