一种基于连续PMCA的PrPSc体外扩增方法的建立

• 作者: 张宝云 王新 王桂荣 石崧 石琦 董小平 董辰方 韩俊
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: Prion病 PrPSc PrPC 蛋白质错误折叠循环扩增
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 282-286
• 页数: 5页
• 分类号: R373.9
• 字数: 3558字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2008.04.007

摘要

为建立一种基于蛋白质错误折叠循环扩增(PMCA)的体外稳定扩增方法以观察PrPSc是否能在体外连续传代,我们分别制备了正常仓鼠和羊瘙痒病因子263K感染的发病仓鼠的全脑匀浆,将两种脑匀浆以不同体积比混合后,分别进行144个循环的直接PMCA和每轮48个循环、共8轮的连续PMCA,用Western blot对PrPSc的扩增情况进行检测.结果显示,与常规的直接PMCA方法相比,连续PMCA能更有效地使低浓度的PrPSc扩增到可检出的水平,表明连续PMCA可以支持羊瘙痒因子263K在体外长期稳定的复制.连续PMCA方法是一种体外高效地扩增PrPSc的方法,有潜力成为一种Prion体外培养方法,用于研究Prion错误折叠和复制机制,以及检测脑组织、外周组织和体液样品中的微量PrPSc.