肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对骨髓基质细胞的毒性作用

• 作者: 刘彦琴 刘景华 周凡 王吉刚 白颖 陈幸华
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓基质细胞 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 诱骗受体 细胞毒性
• 年，卷（期）: 2008,（51）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 10104-10108
• 页数: 5页
• 分类号: R394.2
• 字数: 6178字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.51.015

摘要

背景:已证实肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumot necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)能选择性诱导白血病细胞凋亡,并且不影响正常造血干/祖细胞的功能.但TRAIL对作为造血微环境核心的骨髓基质细胞的毒性作用如何,据作者查新检索目前尚未见系统报道.目的:通过观察TRAIL对骨髓基质细胞的凋亡诱导效应及其造血支持功能的影响,继而评价TRAIL对骨髓基质细胞的毒性作用.设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2006-03/10在解放军沈阳军区总医院中心实验室完成.材料:血常规、骨髓涂片细胞检查正常的骨髓标本11份,取自解放军沈阳军区总医院血液科.化疗药物柔红霉素为浙江海正药业股份有限公司产品,国药准字H33020925.方法:Percoll+贴壁法体外分离培养骨髓基质细胞,达80%融合时胰蛋白酶消化扩增,取处于对数生长期的细胞,分为4组.空白对照组不进行任何干预,柔红霉素组加入0.5 μmol/L柔红霉素作用24 h,TRAIL组加入200 μg/L TRAIL作用18h.联合组加入0.5 μ mot,/L柔红霉素作用6 h后再以200 μ g/L TRAIL作用18 h.取第2代骨髓基质细胞,60Co射线照射消除内源性造血集落,接种后去除悬浮细胞,TRAIL组以200 μg/L TRAIL作用基质细胞层18 h,按1×105/孔将骨髓单个核细胞核种于基质细胞层,扩增5 d后加入甲蕈纤维素培养体系,于37℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度条件下培养10d.主要观察指标:荧光显微镜观察诱骗受体在骨髓基质细胞的表达及定位,流式细胞仪检测柔红霉素对骨髓基质细胞诱骗受体表达的影响,AnnexinV/PI标记TRAIL对骨髓基质细胞的凋亡诱导作用及对其造血支持功能的影响.结果:诱骗受体DcR1和DcR2在骨髓基质细胞中均有表达,主要定位于胞膜及胞浆.0.5 μ mol/L柔红霉素作用24 h后,基本不影响诱骗受体DcR1和DcR2的表达水平.与空白对照组细胞凋亡率比较,TRAIL组无明显变化(t=0.973,P>0.05);柔红霉素组、联合组均显著升高(t=5.141,P=0.001;r=4.187,P=0.002),此两组间比较差异无显著性意义(t=1.222,P>0.05).与空白对照组比较,TRAIL组骨髓单个核细胞数、粒-巨噬集落形成单位均无明显变化(t=1.313,P>0.05:t=1.172.P>0.05)结论:TRAIL的诱骗受体DcR1及DcR2在骨髓基质细胞均有表达,使骨髓基质细胞免于TRAIL的凋亡诱导效应,且TRAIL不增强柔红霉素对骨髓基质细胞的细胞毒性作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周凡	解放军沈阳军区总医院血液科	17	45	4.0	5.0
2	王吉刚	解放军沈阳军区总医院血液科	12	33	3.0	5.0
3	陈幸华	解放军第三军医大学附属新桥医院血液科	3	15	3.0	3.0
4	刘彦琴	解放军沈阳军区总医院血液科	12	33	3.0	5.0
5	白颖	解放军沈阳军区总医院血液科	9	24	3.0	4.0
6	刘景华	解放军沈阳军区总医院血液科	13	34	3.0	5.0