绵羊PRNP等位基因PCR-SSCP分析条件的优化

• 作者: LI Fa-di WANG Chuan 吴润 柳纪省 赵春林
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊 PRNP等位基因 聚合酶链式反应-单链构象多态性 正交试验 分析条件优化
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 基础兽医学
• 页码范围: 721-727
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.7
• 字数: 5962字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2008.08.016

摘要

为进行绵羊PRNP等位基因密码子136、154、171的多态性研究,建立适合于绵羊PRNP等位基因开放阅读框(ORF)内高变区PCR-SSCP分析方法,对凝胶浓度、交联度、甘油浓度、电泳电压、电泳时间、PCR产物与变性缓冲液比例、电泳缓冲液浓度、上样量等影响因素进行了优化试验.在优化中引入了正交试验法,以使优化过程简化,结果可靠.结果表明,交联度49:1、甘油浓度0%、凝胶浓度12%、电泳电压200 V、PCR产物上样量≥2.0μL且<4.0μL、PCR产物与变性缓冲液比例1:4、0.5×TBE缓冲液及4℃电泳45 h为最佳试验条件,据此建立了绵羊PRNP等位基因136、154、171密码子的PCR-SSCP分析方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴润	中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室	5	34	4.0	5.0
2	赵春林	甘肃农业大学动物医学院	7	15	2.0	3.0
3	柳纪省	甘肃农业大学动物医学院	4	9	2.0	3.0
4	WANG Chuan	甘肃农业大学动物医学院	1	6	1.0	1.0
5	LI Fa-di	甘肃农业大学动物医学院	1	6	1.0	1.0