人胎儿骨髓间充质干细胞分离培养与生物学特性

• 作者: 张翊华 杨春荣 沈文正 窦忠英 高志敏
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 人胎儿 骨髓间充质干细胞 分离培养 生物学特性
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 443-449
• 页数: 7页
• 分类号: S188
• 字数: 5048字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2008.03.015

摘要

人胎儿骨髓间充质干细胞(BMMSCs)的群体倍增次数(70～80次)是成体BMMSCs(30～40次)的2倍,分化能力优于成体干细胞.研究采取纵向剪开骨髓腔涮洗细胞法和全骨髓培养法分离2～3月龄流产胎儿BMMSCs,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)筛选基础培养液和血清浓度并制作生长曲线,流式细胞仪和免疫组织化学法鉴定细胞抗原标志,并通过核型分析和成瘤实验评估细胞的安全性.结果表明,沿长轴剪开骨髓腔涮洗细胞法是获得2～3月龄人流产胎儿四肢长骨骨髓的实用方法.在实验范围内α-MEM(minimum essential medium alpha medium)+20%FCS(fetal cattle serum)是体外培养2～3月龄流产胎儿BMMSCs的最佳体系.分离的第3代BMMSCs除表达成体BMMSCs表面抗原标志外还表达Oct4、SSEA3和SSEA4,第6、12和24代细胞在对数增长期的群体倍增时间分别为34、36和40h,且均为二倍体核型、不成瘤.这证明2～3月龄人流产胎儿BMMSCs可以成为人类组织工程和再生医学研究理想的种子细胞.